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液相色譜儀檢測牛奶中氯霉素

更新時(shí)間:2016-11-11      點(diǎn)擊次數(shù):2413

      氯霉素是一種抗生素,對傷寒、百日咳、肺炎等具有良好的治療作用,但長期使用可引發(fā)再生障礙性貧血,因而監(jiān)控其在動(dòng)物源食品中的殘留對開展畜產(chǎn)品檢測及保障食品安全工作有重大意義,可采用液相色譜儀檢測牛奶中氯霉素。

液相色譜儀檢測牛奶中氯霉素儀器設(shè)備

液相色譜儀

紫外檢測器,

SPE固相萃取裝置

氮吹儀

超聲清洗儀

渦旋振蕩儀

離心機(jī)

 

試劑材料濃縮奶;氯霉素標(biāo)品;甲醇(色譜純);乙腈(分析純);乙酸乙酯(分析純)。

色譜柱:C18(5 μm,120 Å,4.6×250 mm,)

液相色譜儀檢測牛奶中氯霉素樣品制備

準(zhǔn)確稱取牛奶5 g(到0.001),加入乙酸乙酯15 mL,渦旋振蕩1 min,搖床振蕩10 min。3000 r/min離心10 min。將上清轉(zhuǎn)移至試管,于45 ℃氮吹儀吹干,用5 mL乙腈-水溶液(5 : 95,v/v)再溶解,超聲10 min,待凈化。
SPE柱凈化

  1. 活化:C18固相萃取柱使用前依次用5 mL甲醇、5 mL水活化。
  2. 上樣:將待凈化液加入已活化好的固相萃取柱中,以1 mL/min的流速過柱,棄去濾液。
  3. 淋洗:用4 mL×2次乙腈-水溶液(5 : 95,v/v)淋洗固相萃取柱,棄去淋洗液,抽干10 min。
  4. 洗脫:用8 mL乙酸乙酯洗脫固相萃取小柱,收集洗脫液。
  5. 重新溶解:洗脫液于45℃氮吹吹干,加1 mL乙腈-水溶液(2 : 8,v/v),超聲10 min溶解,0.45 μm微孔濾膜過濾,供液相色譜儀測定。


色譜條件

色譜柱:C18(5 μm ,120 Å,4.6×250 mm,)

檢測器:UV3000型紫外/可見光檢測器

檢測波長:UV 268 nm 

流動(dòng)相:甲醇/水 = 60/40(v/v)          

流速:0.8 mL/min

柱溫:25 ℃                   

進(jìn)樣量:20 μL

采用此方法進(jìn)行奶制品中氯霉素含量的液相測試,添加回收率達(dá)到97.24%,表明AE.SPE-C18 及C18適于乳制品中氯霉素的純化和測試。

 

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